AcceGen是一家美国生物技术公司。成立于2016年,位于新泽西州费尔菲尔德,AcceGen提供完整和精确的细胞产品和科研服务。AcceGen为客户开发了专有的原代细胞永生化服务科研服务。
Caco-2 (人结直肠腺癌细胞)分离自一位72岁男性直肠原位癌,人结肠癌Caco-2细胞系在标准培养条件下汇合后,自发分化为肠上皮样细胞,是常用的肠癌细胞模型。Caco-2细胞分离自直肠原位癌;当长到满时,Caco-2细胞表现出特征性的肠上皮细胞分化。Caco-2细胞表达维甲酸结合蛋白I和维甲酸结合蛋白Ⅱ,并呈角质蛋白阳性。下面让我们一起来看看AcceGen人结直肠腺癌细胞Caco-2细胞的培养要点吧!
1. 细胞不贴壁怎么办
Caco-2细胞培养基里添加的胎牛血清比例为20%,当血清比例降低,贴壁性下降时,补充胎牛血清至20%,继续培养1-2天,细胞即可贴壁。检查培养基是否偏碱(呈紫红色),偏碱的培养基可能导致细胞无法贴壁。
2. 能否用DMEM替代MEM
可以。DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是在MEM培养基的基础上研制的。Caco-2细胞在DMEM+20%FBS+1%P/S条件下生长状态正常。
3. MEM中不含NEAA会怎样
当使用不含NEAA的MEM培养基时,Caco-2生长速度可能下降,漂浮细胞增多。
4. 细胞消化不下来怎么办
如果消化5-10分钟,细胞部分脱落,另一部分仍然贴壁紧密,可以将脱落细胞转移至离心管,向原瓶中加入新的胰酶,放入培养箱继续消化剩余细胞,每隔1min拿出来观察,直到细胞滑落。
5. 漂浮细胞多怎么办
有少量发亮的细胞漂浮或黏附在细胞克隆上,是正常的,随后会进入克隆并正常生长。所以避免频繁观察细胞,可以减少漂浮细胞产生。
如果Caco-2细胞随着培养过程,漂浮得越来越严重,甚至大块儿飘起,就要检查培养基成分、培养环境是否出现异常了。
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