基于对肿瘤生物标志物特定分析的qPCR和RT-qPCR技术具有较高灵敏度,目前被广泛用于液体活检CTC 和ctDNA的鉴定。相对于基因测序来说,PCR技术更快速、易操作、成本低。然而CTC和ctDNA的分离通常需要新鲜血液样品或其他能够立即处理的样品,并要求短时间内对其分析,这在某种程度上限制了应用。
迈迪安公司推出的抗抑性qPCR预混液(MDX013,MDX016)是开发检测CTC和ctDNA的液体活检产品的理想选择。这两种预混液可以从血液、尿液或唾液等样本中直接扩增目标DNA或RNA。在有抑制剂存在的情况下,使用这两种抗抑性产品可以提高qPCR效率,便于开发出更简单、快速、灵敏的癌症生物标志物检测产品。
通过对含有多种已知PCR抑制剂的样本,如全血和生物 液体以及粗组织裂解液中扩增,每反应中添加20%样本,测定PCR反应效率。 结果表明,在有多种PCR抑制剂存在时,抗抑性qPCR预混液的反应效率保持在90-110%之间。
对不同液体样本类型(尿液,牛奶和脊髓液)的有效扩增
将基因组DNA连续稀释10倍后加入脑脊液、人尿或牛奶中,使用抗抑性qPCR 预混液(绿色)和KAPA Probe Force 预混液(红色)DNA扩增。
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