碧云天生产的BL21(AI)超级感受态细胞,英文名BL21(AI) Super Competent Cells,是一种可以用于表达对细菌有毒性或抑制生长的重组蛋白的E. coli BL21(AI)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,转化效率可以高达1×108cfu/μg DNA以上。
BL21(AI)来源于BL21菌株,可用于基于T7聚合酶的重组蛋白表达系统。二者的主要区别是T7 RNA聚合酶在BL21具有一定基础表达水平,而在BL21(AI)中这一基础表达可降低到极低水平。因此BL21(AI)更适合于对细菌有毒性的重组蛋白表达。
BL21(AI)中araBAD启动子下游T7 RNA聚合酶转录受到L-阿拉伯糖严格控制,培养基中添加葡萄糖可抑制araBAD启动子活性,添加L-阿拉伯糖则驱动T7 RNA聚合酶的转录进而诱导表达重组蛋白。
BL21(AI)为lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株,这两种酶的缺失有效防止异源蛋白在大肠杆菌体内的降解。BL21(AI)感受态细胞适用于任何以T7启动子为基础的表达载体,能够进行高水平的重组蛋白表达[1]。普通重组蛋白在BL21(AI)菌株中获得的产量和其他BL21菌株产量相当;而对大部分毒性蛋白,在BL21(AI)菌株中获得的产量高于BL21 (DE3)PLysS菌株或BL21(DE3)菌株。
BL21(AI)菌株的基因型为F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm araB::T7RNAP-tetA。
...