一、产品简介
小鼠 NK 细胞分离试剂盒
#SN4201
本试剂盒采用阴选的方式,通过无柱磁极分离小鼠脾脏中的NK细胞。分离过程中抗体和磁珠不会接触NK细胞,能够 限度保持NK细胞最原 始的状态。
. 操作简便
. 无需裂红
. 纯度 可达95%
. 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非NK细胞,再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联,然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个 新的管中即可分离,分离后的细胞可立即用于后续应用,如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
二、试剂盒组分
产品名称 | 存储条件 | 缓冲液成分 | 功能 |
EasyIso TM Mouse NK Cell Isolation Cocktail | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 识别非 NK细胞抗体混合液,标记非目的细胞 |
EasyIso TM Streptavidin Nanobeads | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠结合非 NK细胞,通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline 运输条件: 4°C运输
三、设备和试剂要求
. 缓冲液:FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
. 耗材:70 μm无菌尼龙滤网;无菌离心管
. 仪器:离心机 ,磁力架
温馨提示
. 小鼠脾脏研磨后采用70 μm无菌尼龙滤网过滤即可用于分离 ,无需采用红细胞裂解液
. 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作 ,能够提高细胞得率
. 确保FACS Buffer渗透压稳定,免疫细胞较为敏感
. 确保每一步无菌操作,谨防污染
四、操作步骤
步骤 |
说明 |
剂量和时间 |
1 | 准备脾脏单细胞悬液至指定浓度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso TM Mouse NK Cell Isolation Cocktail至样品中 | 100 μL/mL |
3 | 抗体和细胞孵育 | 常温孵育10 min |
4 | 震荡混匀 Streptavidin Nanobeads | 混匀30 s |
5 | 加Streptavidin Nanobeads至样品中 | 100 μL/mL |
6 | 轻柔混匀磁珠和细胞,孵育 | 常温孵育5 min |
7 | 加入FACS Buffer到样品中,轻轻混匀 | 总体积加入至2.5 mL ( 5 mL流式管) 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
8 | 样品置于磁力架上 ,使磁珠吸附 | 单孔磁力架吸附(3 min) 联排磁力架吸附(5 min) |
9 | 倾斜磁力架,将样品倒入新的收集管中,收集样品 | 细胞分离成功 |
英诺思生物代理———北京百奥创新科技有限公司
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