试剂盒组分
产品名称 | 存储条件 | 缓冲液成分 | 功能 |
EasyIso™ Human CD8 T cell Isolation Cocktail | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 识别非CD8 T细胞抗体混合液,标记非目的细胞 |
EasyIso™ Streptavidin Nanobeads | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠结合非CD8 T细胞,通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
运输条件: 4°C运输
设备和试剂要求
温馨提示
操作步骤
步骤 | 说明 | 剂量和时间 |
1 | 准备PBMC单细胞悬液至指定浓度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso™ Human CD8 T Cell Isolation Cocktail至样品中 | 100 μL/mL |
3 | 抗体和细胞孵育 | 常温孵育10 min |
4 | 震荡混匀 Streptavidin Nanobeads | 混匀30 s |
5 | 加Streptavidin Nanobeads至样品中 | 100 μL/mL |
6 | 轻柔混匀磁珠和细胞,孵育 | 常温孵育5 min |
7 | 加入FACS Buffer到样品中,轻轻混匀 | 总体积加入至2.5 mL (5 mL流式管) 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
8 | 样品置于磁力架上,使磁珠吸附 | 单孔磁力架吸附(3 min) 联排磁力架吸附(5 min) |
9 | 倾斜磁力架,将样品倒入新的收集管中,收集样品 | 细胞分离成功 |
数据展示
如图:使用Immuno-X系列产品(#SN3103)从PBMC中分离CD8 T细胞。(A)分选前健康人PBMC中CD8+ T细胞的比例约为14.3%。(B)分选后CD3+CD8+ T细胞纯度达91.2%。
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